描述：All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase) 是一款高效、便捷、減少污染的高質(zhì)量一鏈 cDNA 合成試劑盒，耐高溫逆轉(zhuǎn)錄預混液包含熱穩(wěn)定的 M-MLV GIII Reverse Transcriptase 及其反應 Buffer、RNA 酶抑制劑隨機引物等一鏈 cDNA 合成所需的所有組分。
產(chǎn)品名稱 | 耐高溫逆轉(zhuǎn)錄預混液 |
產(chǎn)品貨號 | EG15133S |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100 rxns |
產(chǎn)品介紹
All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase) 是一款高效、便捷、減少污染的高質(zhì)量一鏈 cDNA 合成試劑盒，耐高溫逆轉(zhuǎn)錄預混液包含熱穩(wěn)定的 M-MLV GIII Reverse Transcriptase 及其反應 Buffer、RNA 酶抑制劑、dNTPs、Oligo(dT)??VN 和隨機引物等一鏈 cDNA 合成所需的所有組分，僅需加入 RNA 模板和水即可開始反應。使用該逆轉(zhuǎn)錄試劑盒獲得的 cDNA 主要用于下游 qPCR 實驗。
從細胞中提取的 RNA 往往存在基因組 DNA 污染，如果逆轉(zhuǎn)錄前不將其去除，下游 qPCR 反應時基因組 DNA 與 cDNA 會同時被擴增（尤其當引物設計在同一外顯子上時），從而影響基因表達定量準確性。本試劑盒采用 dsDNase 高效去除基因組 DNA 污染，dsDNase 能夠特異性消化雙鏈 DNA（dsDNA 或 DNA-RNA 雜合鏈中的 DNA 鏈）， 并且具有熱敏感性，在逆轉(zhuǎn)錄溫度下即可快速不可逆地失活。與傳統(tǒng) 使用 DNase I 去除基因組 DNA 污染的方法相比，dsDNase 無需額外加入 EDTA 進行失活，不僅節(jié)省實驗時間，而且降低了對逆轉(zhuǎn)錄反應的抑制。
可依據(jù)基因組污染嚴重程度選擇采用去基因組 DNA 污染與逆轉(zhuǎn)錄分開進行的操作方法，或者去基因組污染與逆轉(zhuǎn)錄一步法進行的操作方法。
產(chǎn)品組成
組分 | 規(guī)格 |
All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix | 400 μl |
dsDNase | 2×50 μl |
10× dsDNase Buffer | 200 μl |
Nuclease-Free Water | 2×1 ml |
儲運條件
-20℃
